植物提取物常用到检测方法:
国内食品含量检测一般首选参照中国药典,或者食品安全国家标准制定。没有药典标准或者国标的,会备案企业标准。《中药药典》中收载用于药物含量测定的定量分析法主要包括:色谱分析法,光谱分析法,定量分析法。
一、色谱分析法:是一种分离分析方法,系根据混合物中各组分的色谱行为差异,将组分从混合物中分离后再选择性对待测组分进行分析的方法。因此色谱分析法是分析混合物的最有力的手段。
1、HPLC,也叫高效液相色谱法,High performance liquid chromatography 的缩写 即采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。一般分面积归一法,外标法,内标法,植物提取物用前两个比较多。
面积归一法 :操作简单,不用标准品,结果相对准确,但是校正因子确定繁琐和重复性不好。国内植物提取物厂家很多为了节约成本,用的是这种检测方法。
外标法:要用标准品,检测结果准确,但是受标准物质和线性范围影响。标准品分国产和进口的,有时客户会指定进口的标品,价格比较昂贵。很多植提工厂声称用的外标法检测,事实上只是在研发阶段用过标品,投产后只凭经验进行检测,不用标品。
内标法:检测结果很准确但是内标物选择困难。植物提取物一般不用。
2、TLC: 薄层色谱法
系将供试品溶液点样于薄层板上,经展开、检视后所得的色谱图,与适宜的对照物按同法所得的色谱对比,用于药品的鉴别或杂质检查的方法。
HPLC检测方法,因对含有众多成分的复杂体系具有强大的分离功能,且分析速度快,其重现性和准确度优于薄层色谱法。是中药及其制剂含量测定的首选方法,中国药典大多采用 HPLC 进行含量测定。
3、 GC:气色色谱法,Gas chromatography 的缩写系采用气体为流动相流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法,一般用于测挥发物质的含量,比如农药残留 666,DDT 的检测用的就是这种方法。
二、光谱分析法:当物质吸收辐射能或者热能后,其内部发生能级跃迁,记录由能级跃迁所产生的辐射能随波长的变化所得到的图谱成为光谱。利用物质光谱进行定性,定量和结构分析的方法称为光谱分析法。
1、 UV,全称:紫外-可见分光光度法,是 Ultraviolet and visiblespectrophotometry 的缩写,是基于物质分子对紫外光区(波长200~400nm)和可见光区(波长为 400~760nm)的单色光辐射的吸收特性建立的色谱分析方法。
方法特点:简便易行,仪器价格低廉,操作简单,但专属性差,易于对结构相近的有关物质缺乏选择性。适用范围:一般测一类物质的总和,比如测万寿菊提取物中β类胡萝卜素类物质。如叶黄素 10%UV。
HPLC 和 UV 的区别:以肉包子(猪肉,鸡肉,牛肉…混合馅)为例
UV 测肉馅儿里各种肉量的总和
HPLC 测猪肉、鸡肉等每种肉的用量
2、AAS 原子吸收光谱(Atomic Absorption Spectroscopy 的缩写),是基于气态的基态原子外层电子对紫外光和可见光范围的相对应原子共振辐射线的吸收强度来定量被测元素含量为基础的分析方法,是一种测量特定气态原子对光辐射的吸收的方法。AAS 原子吸收法,常用于植物提取物的重金属铅,砷,汞,镉四项的检测。
三、定量分析法(也称滴定法),是将已知浓度的滴定液(标准物质溶液)由滴定管滴加到被测溶液中,直至滴定液与被测物质反应完全(通 过适当方法指示),然后根据滴定液的浓度和被消耗的体积,按化学 计量关系计算出被测物质的含量。植物提取物中用的比较少,此处不 详细介绍。
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