橄榄叶提取物-山楂酸在人结直肠腺癌细胞系 HT-29 中的有效抗增殖活性。三萜在高达 250 μM 时未表现出非特异性细胞毒性，但在暴露 72 小时后发挥剂量依赖性抗增殖活性，IC 50为 101.2 μM。Reyes等人发现了类似的结果。在结肠癌细胞系 HT-29 和 Caco-2 中，与三萜一起孵育 72 小时导致细胞生长受到 IC 50抑制分别为 61 μM 和 85 μM。同一作者的进一步实验表明，山楂酸通过阻止细胞周期发挥其抗增殖活性，因为 G0/G1 期细胞群显着增加，而 S 期细胞群减少。值得注意的是，在这两项研究中，该化合物对细胞增殖的影响与凋亡细胞死亡同时发生。
与载体处理的细胞相比，caspase-3 的激活在暴露于 250 μM 三萜的 24 小时时超过 60 倍。为了了解 caspase-3 的激活是由外在途径还是内在途径引起的，对超氧阴离子的产生进行了评估，因为它是后者的可能诱导物之一。实际上，与对照相比，在用山楂酸 (150 μM) 孵育 4 小时的细胞中发现了更高水平的 O 2 - 。质膜崩解和核碎裂的发生进一步证实了细胞凋亡过程。同样，在 HT-29 和 Caco-2 细胞系中观察到的细胞凋亡过程是通过激活 caspase-3 发生的，如细胞收缩或染色质浓缩等形态学变化的观察所证明的那样。
然后注意诱导线粒体凋亡途径的分子事件。该细胞器是几种促凋亡蛋白的储库，在适当的刺激下，这些蛋白会释放到细胞质中，在细胞质中与其他元素的相互作用最终会触发 caspase-3 激活。该通路的一组重要调节因子是 Bcl-2 家族，其中包括抗凋亡和促凋亡成员。
Reyes-Zurita等人进行的实验。用 HT-29 细胞表明山楂酸同时激活 Bax（促凋亡蛋白）的表达并抑制 Bcl-2（抗凋亡蛋白）的表达，导致线粒体破坏和细胞色素-c 释放到胞质溶胶。众所周知，一旦进入细胞质，细胞色素-c 就会与 Apaf-1 结合，从而触发 caspase-9 和 caspase-3 的顺序激活。虽然在这项研究中没有直接测定复合物的形成，但观察到两种 caspase 的强烈时间和剂量依赖性裂解。
最近，同一位作者假设橄榄叶提取物-山楂酸对 Bcl-2 家族蛋白的影响可能是由激酶 JNK 介导的，因为在用三萜处理 12 小时后发现其在 HT-29 细胞中的表达增加。实际上，之前已经描述了 JNK 的一些作用。鹤田等人。发现 JNK 通过 Bax 细胞质锚的磷酸化（失活）促进 Bax 易位至线粒体。JNK 激活的另一个结果是 Bid（促凋亡蛋白）的裂解，这导致易位至线粒体和 Smac/DIABLO 释放至胞质溶胶。这种蛋白质通过中和细胞凋亡抑制剂 (IAP) 诱导细胞凋亡. 除了 JNK 激活外，山楂酸还增强了 p53 的表达，p53 是一种众所周知的肿瘤抑制转录因子，可调节细胞凋亡相关基因的表达，例如编码上述 Bcl-2 和 Bax 蛋白的基因。
与内在途径相反，外在途径是由配体与肿瘤坏死因子受体 (TNFR) 超家族的受体结合启动的。这导致几个元素的组装，构成了所谓的复杂 I。接下来，两种可能的方式触发具有相反结果的细胞凋亡调节。一方面，复合物 I 可以激活激酶 IKK，负责 IKBα 的磷酸化及其随后的降解。IKBα 通常在胞质溶胶中募集 NF-κB，但在其降解后，转录因子被释放并转移到细胞核，在细胞核中上调抗凋亡基因 . 另一方面，复合物 I 的某些元素可以交换，包括 procaspase-8 的募集，这导致二级复合物（复合物 II）的形成。procaspase-8 的激活导致下游效应子半胱天冬酶（如 caspase-3）的裂解，从而传播凋亡信号。
橄榄叶提取物-山楂酸在死亡受体通路中的作用。使用胰腺癌细胞Panc-28。该化合物与 TNF-α 一起对抑制细胞增殖（10 μM 山楂酸）和诱导细胞死亡（25 μM）发挥协同作用，后者比对照高 55% 以上。细胞中活化的caspase-3的测定证实了细胞凋亡的发生。进一步的实验表明，山楂酸通过抑制 IKBα 磷酸化影响 NF-κB 通路，从而阻止 NF-κB 易位至细胞核及其 DNA 结合活性。
橄榄叶提取物-山楂酸对 NF-κB DNA 结合活性的抑制作用也在 Raji B 淋巴瘤细胞系中得到证实。在这项研究中，NF-κB 的功能受损被用来解释 COX-2 表达的剂量依赖性降低。COX-2 因其在炎症过程中的作用而广为人知，并且已被发现在广泛的癌前和恶性组织中过度表达。
NF-κB 转录活性可通过丝裂原活化蛋白激酶家族 (MAPK) 的各种成员（包括 JNK 和 p38）的磷酸化作用进行调节 。吴等。首次描述橄榄叶提取物-山楂酸还与 p38 级联相互作用，从而最终触发促凋亡作用。实验在两种人唾液腺腺样囊性癌细胞系 ACC-2 和 ACC-M 中进行，分别对应于低转移和高转移。孵育 24 小时后的抗增殖活性 (IC 50分别为 43.6 和 45.8 μM）归因于细胞凋亡过程，观察到的细胞凋亡小体和微观结构变化（例如染色体 DNA 浓缩和微绒毛丢失）证明了这一点。暴露于三萜的细胞显示出活化的 caspase-3，这是由于 p38 MAPK 磷酸化而发生的，而这反过来又是细胞内 Ca 2+浓度增加的结果。山楂酸引起细胞内 Ca 2+超载的机制仍有待研究。相反，p38 MAPK 在山楂酸诱导的细胞凋亡中的意义与在两种人膀胱癌细胞系（T24 和 253J）中获得的结果一致. 与三萜一起孵育会剂量和时间依赖性地增加 p38 磷酸化，这与细胞存活率降低相关（每种细胞系中的IC 50分别为 33.0 和 71.8 μM）。
最新的橄榄叶提取物-山楂酸体外抗增殖活性评估是在软组织肉瘤细胞系 SW982（人滑膜肉瘤）和 SK-UT-1（平滑肌肉瘤）中进行的。将细胞与三萜孵育 24 小时后，IC 50值分别为 45.3 和 59.1 μM . 然而，这项研究最显着的贡献是山楂酸被提议作为已建立的抗癌药物多柔比星的佐剂，这构成了治疗癌症疾病的新治疗方法。具体而言，由于药物在细胞内的积累增加，同时用两种化合物处理的细胞对多柔比星表现出更高的敏感性。由于多柔比星是流出蛋白 P-gp 和 MRP1 的众所周知的底物，因此当与山楂酸共孵育时，药物在细胞内积累背后的一个似是而非的机制可能是三萜抑制了这些转运蛋白。动力学研究表明，参数 V max和 K mP-gp 的（通过 Michaelis-Menten 方程获得）不受山楂酸的影响，而 MRP1 的那些则呈剂量依赖性降低，因此表明山楂酸表现为 MRP1 的非竞争性抑制剂 。总结了在不同细胞系中发现的山楂酸抗增殖活性的IC 50值。
